描述

Pazopanib (GW786034) 是多靶点抑制剂，抑制 VEGFR1，VEGFR2，VEGFR3，PDGFRβ，c-Kit，FGFR1，c-Fms的IC50分别为10，30，47，84，74，140，146 nM。

相关类别

信号通路 >> 自噬 >> 自噬

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> c-Kit

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> FGFR

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> PDGFR

信号通路 >> 蛋白酪氨酸激酶 >> VEGFR

研究领域 >> 癌症

靶点

VEGFR1:10 nM (IC50)

VEGFR2:30 nM (IC50)

VEGFR3:47 nM (IC50)

PDGFRβ:84 nM (IC50)

FGFR1:140 nM (IC50)

c-Kit:74 nM (IC50)

c-Fms:146 nM (IC50)

体外研究

帕唑帕尼显示出对所有人VEGFR受体的良好效力，VEGFR-1，-2和-3的IC50分别为10,30和47nM。对于密切相关的酪氨酸受体激酶PDGFRβ，c-Kit，FGF-R1和c-fms也观察到显着的活性，IC50分别为84,74,140和146nM。在细胞试验中，除抑制VEGF诱导的HUVEC增殖外，帕唑帕尼还有效抑制VEGF诱导的HUVEC细胞中VEGFR-2的磷酸化，IC50为~8 nM。 Pazopanib在大鼠，狗和猴中具有良好的药代动力学，具有低清除率（1.4-1.7mL / min / kg）和良好的口服生物利用度（72,47,65％），分别以10,1和5mg / kg给药。除2C9（7.9μM）外，细胞色素P450谱对针对所测试的同工酶的抑制>10μM也得到改善[1]。

体内研究

用100mg / kg帕唑帕尼每天两次治疗小鼠五天导致血管化程度的显着抑制。在标准的三周疗程后，使用HT29（结肠癌），A375P（黑素瘤）和HN5（头颈癌）肿瘤在携带已建立的人异种移植物（200-250mm 3）的小鼠中检查帕唑帕尼的抗血管生成活性。与A375P模型相比，HN5和HT29异种移植物在所有剂量下反应更好，A375P模型历来对VEGFR-2抑制剂具有更强的抗性。作为观察到的异种移植物生长抑制作用通过抗血管生成而不是抗肿瘤机制的支持，对于在含血清培养基中生长的这些人肿瘤系（HT29，HN5，A375P），帕唑帕尼在10μM以下未观察到抗增殖活性。没有观察到对小鼠体重的显着影响，并且在整个研究期间动物看起来健康且活跃[1]。 Pazopanib滴眼剂组中粘附的白细胞数量少于未治疗的糖尿病动物，且多于健康动物。在健康动物中粘附到视网膜脉管系统的平均白细胞是37.2±7.8，而糖尿病动物的平均值是102±15.6，比健康动物高约3倍。用0.5％w / v帕唑帕尼悬浮液处理的动物显示其视网膜脉管系统中粘附有69.5±9.5个白细胞，发现其明显低于糖尿病动物[2]。

激酶实验

VEGGR1，VEGFR2和VEGFR3的VEGFR酶测定在384孔微量滴定板中以均相时间分辨荧光（HTRF）形式进行，使用编码催化c-的纯化的杆状病毒表达的谷胱甘肽-S-转移酶（GST）融合蛋白。人VEGFR受体激酶1,2或3的末端通过加入10μL活化的VEGFR2激酶溶液[最终浓度，在0.1M 4-（2-羟乙基）-1-哌嗪乙磺酸中的1nM酶）引发反应（ HEPES），pH 7.5，含有0.1 mg / mL牛血清白蛋白（BSA），300μM二硫苏糖醇（DTT）至10μL底物溶液[终浓度，360 nM肽，（生物素 - 氨基己基-EEEEYFELVAKKKK-NH2），75μM ATP，10μMMgCl2]和在DMSO中的1μL滴定化合物。将板在室温下孵育60分钟，然后通过加入20μL100mM乙二胺四乙酸（EDTA）淬灭反应。猝灭后，加入20μLHTRF试剂（终浓度，15nM链霉抗生物素蛋白连接的别藻蓝蛋白，1nM铕标记的抗磷酸酪氨酸抗体，稀释于0.1mg / mL BSA，0.1M HEPES，pH7.5），并将板孵育至少10分钟使用Wallac Victor平板读数器使用50μs的时间延迟测量665nM的荧光[1]。

细胞实验

使用市售试剂盒，使用5-溴-2-脱氧尿苷（BrdU）掺入法测量帕唑帕尼对细胞增殖的影响。将HUVEC接种在含有5％胎牛血清（FBS）的培养基中的1型胶原包被的96孔板中，并在37℃，5％CO 2下孵育过夜。从细胞中吸出培养基，向各孔中加入各种浓度的帕唑帕尼无血清培养基。 30分钟后，向孔中加入VEGF（10ng / mL）或bFGF（0.3ng / mL）。将细胞再孵育72小时，并在孵育的最后18至24小时期间添加BrdU（10μM）。在孵育结束时，通过ELISA测量细胞中BrdU的掺入。数据拟合由等式描述的曲线，y = Vmax（1-（x /（K + x））），其中K等于IC50 [1]。

动物实验

小鼠[1]通过在8-12周龄裸鼠中注射肿瘤细胞悬浮液来启动肿瘤。当肿瘤达到100-200mm 3的体积时，将小鼠随机分成8组。帕唑帕尼每天给药一次或两次，剂量为10,30或100mg / kg。在研究完成时通过吸入CO 2使动物安乐死。使用以下等式每周两次测量肿瘤体积：肿瘤体积（mm 3）=（长度×宽度2）/ 2。结果通常报告为％抑制= 1-（药物处理群体的平均生长/载体处理的对照群体的平均生长）。大鼠[2]在任何实验程序之前，使体重为200-250g的雄性Brown-Norway（BN;色素沉着）大鼠适应环境至少两天。禁食12-16小时后，给予腹膜内注射30mg / mL链脲佐菌素在10mM柠檬酸盐缓冲液（pH4.5）中的溶液（60mg / kg体重）以诱导糖尿病。注射链脲佐菌素3-4小时后，对动物进行常规饮食，注射链脲佐菌素后24小时，通过尾静脉收集血样（5-10μL）。用葡萄糖监测仪测定动物的血糖水平。血糖水平大于250mg / dL的动物被认为是糖尿病。动物分为三组。第1组：健康（n = 12），第2组：糖尿病（n = 12）和第3组：糖尿病+治疗（n = 12）。糖尿病诱导后立即开始治疗。用0.5％w / v帕唑帕尼悬浮液（每只眼睛10μL体积）每天两只眼睛给药30天，并且在第30天最后一次给药后第31天，第16-17小时处死所有组中的动物。

参考文献

[1]. Harris PA, et al. Discovery of 5-[[4-[(2,3-dimethyl-2H-indazol-6-yl)methylamino]-2-pyrimidinyl]amino]-2-methyl-benzenesulfonamide (Pazopanib), a novel and potent vascular endothelial growth factor receptor inhibitor. J Med Chem. 2008, 51(15), 4632-4640.

[2]. Thakur A, et al. Pazopanib, a multitargeted tyrosine kinase inhibitor, reduces diabetic retinal vascular leukostasis and leakage. Microvasc Res. 2011 Nov;82(3):346-50.

密度

1.4±0.1 g/cm3

沸点

728.8±70.0 °C at 760 mmHg

熔点

285-289°C (dec.)

分子式

C21H23N7O2S

分子量

437.518

闪点

394.6±35.7 °C

精确质量

437.163391

PSA

127.41000

LogP

1.98

蒸汽压

0.0±2.4 mmHg at 25°C

折射率

1.702

储存条件

Refrigerator

风险声明 (欧洲)

43-62/63

安全声明 (欧洲)

36/37/39-28B

5-({4-[(2,3-Dimethyl-2H-indazol-6-yl)(methyl)amino]-2-pyrimidinyl}amino)-2-methylbenzenesulfonamide

Pazopanib(GW786034)

Benzenesulfonamide, 5-[[4-[(2,3-dimethyl-2H-indazol-6-yl)methylamino]-2-pyrimidinyl]amino]-2-methyl-

5-({4-[(2,3-Dimethyl-2H-indazol-6-yl)(methyl)amino]pyrimidin-2-yl}amino)-2-methylbenzenesulfonamide

Pazopanib