解说|1435934-25-0|A 419259 trihydrochloride参考用途

常用名

A 419259三盐酸盐

英文名

A 419259 (trihydrochloride)

CAS号

1435934-25-0

分子量

592.00300

密度

无资料

沸点

无资料

分子式

C29H37Cl3N6O

熔点

无资料

闪点

无资料

体外研究

A 419259 Trihydrochloride是第二代吡咯并嘧啶，旨在提高相对于其他细胞质酪氨酸激酶对Src家族的选择性。 A-419259抑制K-562细胞，IC50在0.1和0.3μM之间，Meg-01增殖，IC50约为0.1μM。 A-419259还有效诱导K-562细胞凋亡，从0.1μM开始并以剂量依赖性方式增加。 PP2抑制Ph +细胞系（K-562和Meg-01）中的Src激酶自磷酸化，IC50在3和10μM之间，而A-419259阻断0.1和0.3μM之间的激酶活化。在缺乏IL-3的情况下，A-419259强烈抑制DAGM / Bcr-Abl细胞增殖，IC50在0.1和0.3μM之间[1]。 A-419259是一种广谱的吡咯并嘧啶抑制剂，可阻断CML细胞系的增殖并诱导细胞凋亡。 A-419259抑制K562和其他CML细胞系中的整体SFK活性，IC50值为0.1-0.3μM[2]。

激酶实验

对His（6）标记的Lck（残基62-509）和从Sf-9细胞纯化的全长c-Abl以及Lyn，Src和PKC的商业来源进行体外激酶测定。用基于ELISA的测定法测量Lck，Lyn，Src和Abl活性。将平底96孔ELISA板与200μg/ mL聚（Glu，Tyr）4：1底物在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中的溶液在37℃温育1小时，然后用含有0.1％吐温的PBS洗涤。 -20（PBS-T）。在激酶测定缓冲液（250mM Mopso，pH 6.75,10mM MgCl 2,2mM MnCl 2,2.5mM DTT，0.02％BSA，2mM Na 3 VO 4,5％DMSO，5）中加入已经含有适当酶的洗涤板中的抑制剂稀释液。 μMATP）。在室温下孵育20分钟后，用PBS-T洗涤平板三次，用抗磷酸酪氨酸-HRP抗体偶联物检测平板结合的磷酸酪氨酸，随后用K-Blue试剂显色。所有分析都经过优化，使用最少量的酶来获得可重复的信噪比[1]。