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产品描述

General description

DIG Gel Shift Kit, 2^nd generation contains reagents for nonradioactive 3′-end labeling of oligonucleotides, to be used in a "gel mobility shift" assay. It also contains offers, electrophoresis reagents and an enzyme-labeled antibody to facilitate the detection of DNA-protein complexes.
DIG Gel Shift Kit employs recombinant terminal transferase and digoxigenin (DIG)-11- dideoxyuridine triphosphate (ddUTP) makes the labeling reaction very flexible. It can be used to label the 3′ ends of any oligonucleotide (whether it has a 5′- overhanging end, a 3′-overhanging end, or blunt ends). Both single- and double-stranded DNA can be labeled.

We are committed to bringing you Greener Alternative Products, which adhere to one or more of The 12 Principles of Greener Chemistry. This product is designed as a safer chemical.  The DIG System was established as a sensitive and cost-effective alternative to radioactivity for the labeling and detection of nucleic acids. There are many available publications that prove the versatility of the DIG System, so use of radio-labeling is no longer the only option for labeling of DNA for hybridization.

Application

DIG Gel Shift Kit, 2^nd generation has been used for nonradioactive detection of sequence-specific DNA binding proteins. The DIG Gel Shift Kit is used to prepare nonradioactive, 3′-end labeled oligonucleotide probes to detect DNA-protein complexes in a "gel mobility shift assay".^{[2] [1]}

Features and Benefits

电泳试验使用较短（30 到 100 bp）的 DNA 片段时效果*，因为这些不太可能有特异结合站点以外的序列，但可以与靶蛋白发生非特异性相互作用。
方便，因为该技术不需要特殊的设备或技术。
重现性，因为 DIG 标记探针无限期稳定。
安全，因为该测定是非放射性的。
可靠，因为试剂盒提供了 DIG 标记的对照寡核苷酸，以确定检测是否有效。
使用试剂盒中提供的质控品进行功能测试 （参见“质量”）。
灵敏，因为试剂盒可以检测低至 20fmol 的对照寡核苷酸（根据试剂盒方案标记后）。

包装

1 个试剂盒包含 16 种组分。1 个试剂盒，用于多达 20 个与DIG-11-ddUTP的寡核苷酸 3 端标记反应，200 个结合反应，化学发光检测反应，最多 20 个印迹，DNA 结合蛋白和寡核苷酸，最多 20 个对照反应

Physical form

氯酚红-β-D-吡喃半乳糖苷，单钠盐

Preparation Note

近年来，快速简便的“凝胶阻滞”或“凝胶迁移率变动”分析法极大地促进了 DNA-蛋白质相互作用的研究。由于游离 DNA 和 DNA-蛋白质复合物在凝胶电泳过程中迁移方式不同，因此可以在天然（非变性）聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶上进行分离和检测。

样品
数量：3.85 pmol 或 100 ng
类型：含 5′-悬垂端，3′-悬垂端或钝端的寡核苷酸；单链或双链 DNA 片段 (30-200 bp)
注： 理想情况下，要标记的片段应在 30-100 bp 之间。
所需时间
寡核苷酸退火和标记：10 min
寡核苷酸-蛋白复合物的形成：25 min
电泳：1 小时至整夜，取决于电泳系统
印迹法：1-2 小时
免疫学检测：2 小时
X 射线胶片或成像仪曝光：15-40 min

Other Notes

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。