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产品描述

General description

使用该酶，可以产生同源标记的单链 RNA。转录物可以用生物素或 DIG-11-UTP 进行非放射性标记，或用 [α-³²P]-或[α-³⁵S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。T3 RNA 聚合酶是一种 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对其启动子具有高特异性。只有位于 T3 启动子下游的 DNA 才会被转录。

Specificity

启动子特异性
T3 RNA 聚合酶具有极高的启动子特异性，仅转录噬菌体 T3 DNA 或克隆到 T3 启动子下游的 DNA。
热失活：通过加入 2 μl 0.2M EDTA（pH8.0）和/或加热至 65℃ 来终止反应。

Application

T3 RNA 聚合酶可以从克隆 DNA 模板（位于 T3 启动子下游）转录 RNA。使标记的 NTP 可以合成高度标记的 RNA。合成的 RNA 可用于许多应用，包括：? RNA 或 DNA 印迹技术
原位杂交
RNase 保护研究：将酶合成的转录物用作前体 RNA，用于 RNA 剪接和加工的研究。
在转录反应期间，通过在 GTP 或 ATP 上过量添加 m7GpppG 或 m7GpppA，在体外合成加帽的 RNA。产生的反义 RNA 可导入细胞中，抑制相应基因的表达。

包装

1 个试剂盒包含 2 种组分

Quality

根据当前的质量控制程序测试不含内切核酸酶、切割活性和 RNA 酶。使用 SP6/T7 转录试剂盒进行功能测试。

Specifications

体积活性： =20 U/μl
杂交探针的合成：T3 RNA 聚合酶允许高效产生均一标记的 RNA。该标记的 RNA 可用作 Southern、Northern 和斑点印迹中的杂交探针，以及原位杂交。
合适的标记：转录物可以用生物素-16-UTP、DIG-11-UTP 或荧光素-12-UTP 进行非放射性标记。它们还可以用 [a-32P]-或 [a-35S] 标记的核苷酸放射性标记至高比活性。

注意：罗氏拥有 10 倍浓缩的 RNA 标记混合物，专为 DIG-、生物素和荧光素标记而设计。这些混合物适用于 T3 RNA 聚合酶。

Unit Definition

一个单元是在 +37°C 下，60 分钟内，在酸可沉淀的 RNA 产物中掺入 1 nMol CMP 的酶活性。

体积活性：≥20 U/μl

Preparation Note

活化剂：BSA/精胺

Other Notes

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。