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产品描述

• 于热稳定性的RNase抑制剂：即使使用热稳定性逆转录酶（如Transcripto

  r逆转录酶）的条件下，Protector RNase抑制剂仍保持稳定。

• 兼容广泛的反应条件：Protector RNase抑制剂在pH 5.0至9.0条件下和+25°C至+55°C的温度

  下都具有活性（+60°C时仍保留部分活性）。

• 避免各种RNA分析应用中的干扰：即使升高到标准浓度的16倍仍保持正常效能。

• 持续提供高纯度产物：每一批次的产品都进行严格质控流程，经实时定量RT-

  PCR等标准技术检测，确保不含核酸内切酶、核糖核酸

  酶或切割活性。
  

  
  

  Quality

  每一批次的Protector RNase抑制剂均使用Titan One Tube RT-PCR试剂盒和LightCycler DPD试剂盒进行功能测试。Protector RNase抑制剂还经过污染活性测试，如下所述。
  测试缓冲液：50 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，0.1 mM EDTA，7 mM β-巯基乙醇；pH 7.5 (+37°C)。
  不含核酸内切酶：在+37°C下，将1 μg的λDNA-EcoR I/Hind III*片段与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时。“核酸内切酶（Endo）”部分描述了不会导致带型发生变化的抑制剂用量。
  不含开口活性：在+37°C下，将1 μg的超螺旋pBR322 DNA与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时。“开口活性（Nick.Act.）”部分描述了不会导致超螺旋DNA松弛的抑制剂用量。
  不含核糖核酸酶(1)：在+37°C下，将5 μg的MS2 RNA与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时。“RNase 1”部分描述了不会导致MS2 RNA降解的抑制剂用量。
  不含核糖核酸酶(2)：在+37°C下，将5 μg的MS2 RNA与Protector RNase抑制剂在50 μl测试缓冲液中一起孵育1小时，然后在 +65°C孵育10分钟。“RNase 2”部分描述了不会导致MS2 RNA降解的抑制剂用量。

  Unit Definition

  1单位Protector RNase抑制剂定义为将5ng RNase A的活性抑制50%所需的酶量。
  
  单位检测：按照Blackburn测试法，通过抑制环状胞苷-2'：3'-单磷酸的水解测定活性。在实验条件下，200U的Protector RNase抑制剂能够将1 μg RNase A的活性抑制50%。
  
  体积活性：40 U/μl

  Preparation Note

  工作浓度：

• 一步法RT-PCR中使用5至10 U

• 两步法RT-PCR中使用25至50 U

• 体外转录使用20 U
  如果您怀疑RNase污染会导致当前样本难以扩增，可

  在RT-PCR反应中应用更高浓度的Protecto

  r RNase抑制剂。抑制剂不会对反应效率造成干扰。（

  在测试系统中，即使抑制剂的使用浓度超出16倍
  也不会对RT-PCR反应造成干扰。）

  
  

  Other Notes

  产品详细说明：
  来源：大鼠肺部；在大肠杆菌中进行重组
  等电势点：pH 4.5
  Protector RNase抑制剂的活性温度：25°C至+55°C；+60°C下仍具可测活力
  失活条件：在强烈的变性条件（+65°C以上温度）下，本抑制剂将被失活
  生物负载：<50 cfu/ml
  DNA成份：<100 pg/mg

  仅用于生命科学研究。不可用于诊断。