基因表达分析通常通过瞬时转染进行分析。这些系统通常基于使用插入细胞的融合基因,并在引入 DNA 后 48 小时内分析基因的表达。通常,融合由研究中的启动子结合位点或增强子序列组成,其与报告基因连接。在实验条件下合成的报告蛋白的量推测反映了所研究序列直接或促进转录的能力。
荧光素酶已成为应用较为广泛的报告酶之一。报告质粒含有来自萤火虫的基因。该酶催化生物发光反应,该反应需要底物荧光素以及Mg +2 +和ATP。将这些试剂与含有荧光素酶的细胞提取物混合,会导致闪光快速衰减。这种光可用光度计检测到。总光发量与样品的荧光素酶活性成正比。荧光素酶试验快速且灵敏,不需要像 CAT 试验那样的放射性底物。荧光素酶测定的缺点是它需要相当昂贵的仪器,即发光计来测量酶活性。