常用名

CWHM-12

英文名

CWHM-12

CAS号

1564286-55-0

分子量

590.466

密度

1.5±0.1 g/cm3

沸点

无资料

分子式

C26H32BrN5O6

熔点

无资料

闪点

无资料

体外研究

CWHM-12（CWHM 12）也不太有效地抑制αvβ5（IC50 = 61nM）和αIIbβ3/α2β1/α10β1（IC50> 5000nM）。 CWHM-12在体外配体结合试验中表现出对所有五种可能的β亚基结合配偶体（αvβ1，αvβ3，αvβ5，αvβ6和αvβ8）的高效力，对αvβ5的效力略低于其他αv整联蛋白[1]。 。

体内研究

用CCl4处理小鼠3周以建立纤维化疾病，然后用CWHM-12（CWHM12）或媒介物处理CCl4的最后3周。即使在纤维化疾病确立后，CWHM-12也显着减少肝纤维化。与对照相比，数字图像定量显示CWHM-12处理的小鼠的肝脏中p-SMAD3信号传导显着降低，证明在CWHM-12处理的小鼠中观察到的对CCl4诱导的肝纤维化的保护至少部分是由于αv整合素激活TGF-β。此外，CWHM-12的使用显着抑制肺纤维化的进展[1]。

激酶实验

使用纯化的重组人整联蛋白，使用无细胞受体 - 配体相互作用测定法测量整联蛋白αvβ1，αvβ8，α2β1和α10β1的功能。使用的配体是用于αvβ1的人纤连蛋白，用于αvβ8的人LAP，用于α2β1的牛胶原蛋白II和用于α10β1的鼠层粘连蛋白I.将96孔板用预定的最佳配体浓度包被过夜，用TBS +++（25mM Tris pH7.4,137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl 2,1mM MnCl 2,1mM CaCl 2）洗涤3次，并用TBS +++ / 1％BSA。将纯化的整联蛋白在含或不含化合物（例如CWHM-12）的TBS +++ / 0.1％BSA中稀释，并根据标准模板将溶液加入洗涤的配体包被的板的空孔中，每个样品重复三次。在室温下温育2小时后，将板用TBS +++洗涤3次。应用针对αv亚基（αvβ1，αvβ8测定）或β1亚基（α2β1，α10β1测定）的生物素标记的抗体1小时。将板用TBS / 0.1％BSA洗涤3次。将链霉抗生物素蛋白缀合的辣根过氧化物酶加入孔中，并将板在室温下温育20分钟。在3X TBS +++洗涤后，使用链霉抗生物素蛋白缀合的辣根过氧化物酶和TMB底物检测结合的整联蛋白，在650nm处测量吸光度。为了测定αIIbβ3（IIbIIIa）功能，将板用纯化的人整联蛋白包被过夜，用TBS +++洗涤3次，并用TBS +++ / 1％BSA封闭。将Alexa Fluor647标记的纯化的人纤维蛋白原在含或不含化合物的TBS +++ / 0.1％BSA中稀释，并将溶液加入到整联蛋白包被的平板中。温育2小时后，将板用TBS +++洗涤3次，并通过在640 / 668nm处测量的吸光度检测结合的配体。对于所有测定，通过非线性回归分析构建浓度 - 响应曲线，并使用GraphPad Prism软件[1]计算IC 50值。