头条信息|887375-67-9|K-115参考用途

常用名

盐酸瑞舒地尔

英文名

K-115

CAS号

887375-67-9

分子量

395.877

密度

无资料

沸点

无资料

分子式

C15H23ClFN3O4S

熔点

无资料

闪点

无资料

体外研究

Ripasudil（K-115）是ROCK的有效抑制剂，ROCK2和ROCK1的IC50分别为19和51 nM。 Ripasudil对CaMKIIα，PKACα和PKC的抑制活性也较低，IC50分别为370 nM，2.1μM和27μM[1]。 Ripasudil（K-115;1,10μM）诱导细胞骨架变化，包括回缩和细胞变圆以及培养的小梁网（TM）细胞的肌动蛋白束减少。 Ripasudil（5μM）显着降低经内皮电阻（TEER），并增加Schlemm管内皮细胞（SCE）单层细胞的FITC-葡聚糖渗透性[2]。

体内研究

Ripasudil（K-115）以浓度依赖性方式降低眼内压（IOP），在猴眼中浓度为0.1％至0.4％，在兔眼中浓度为0.0625％至0.5％[1]。 Ripasudil（K-115; 1 mg / kg，每日口服）显示神经压迫（NC）后视网膜神经节细胞（RGC）的神经保护作用。 Ripasudil还抑制小鼠轴突损伤诱导的氧化应激。 Ripasudil抑制NC损伤后RGC中ROS的时间依赖性产生[3]。

激酶实验

将ROCK 1（0.75 ng / mL）和ROCK 2（0.5 ng / mL）与各种浓度的Ripasudil，Y-27632或HA-1077在25°C下在50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）中孵育90分钟）含有100mM KCl，10mM MgCl 2,0.1mM EGTA，30mM长S6激酶底物肽和1mM ATP，总体积为40mL。 PKACa，PKC和CaMKIIa也与各种浓度的Ripasudil，Y-27632或HA-1077一起温育。将PKACa（0.0625 ng / mL）在含有20 mM MgCl 2,1 mg / mL BSA，5 mM Kemptide肽底物和1 mM ATP的40 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）中于25°C孵育30分钟总体积为40 mL。将PKC（0.025 ng / mL）在含有20 mM MgCl 2,0.4 mM CaCl 2,0.1 mg / mL BSA，0.25 mM EGTA，25 ng / mL的20 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）中于25°C孵育80分钟磷脂酰丝氨酸，2.5ng / mL二酰基甘油，0.0075％Triton-X-100,25mM DTT，10mM Neurogranin（28-43）肽底物和1mM ATP，总体积为40mL。将CaMKIIa（0.025 ng / mL）在含有10 mM MgCl2,2 mM CaCl2,0.04 mg / mL BSA，16 mg / mL纯化钙调蛋白的50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）中于25°C孵育90分钟睾丸，500mM DTT，50mM Autocamitide 2和1mM ATP，总体积为40mL。孵育后，加入40mL KinaseGlo发光激酶测定溶液，并使其在25℃保持10分钟，并使用发光计测量相对光单位（RLU）。不含试验化合物的RLU设定为100％（对照值），不含酶和化合物的RLU设定为0％（正常值）。然后通过添加每种浓度的测试化合物从RLU计算反应速率（对照的％），并且使用SAS [1]通过逻辑回归分析确定50％抑制浓度（IC 50）。